1、什么是EB病毒?

　　EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)是皰疹病毒科嗜淋巴細胞病毒屬的成員，屬于人類皰疹病毒4型，基因組為DNA。

　　EB病毒具有在體內外專一性地感染人類及某些靈長類B細胞的生物學特性。人是EB病毒感染的宿主，主要通過唾液傳播。無癥狀感染多發生在幼兒，3～5歲幼兒90%以上曾感染EB病毒，90%以上的成人都有病毒抗體。

　　2、EBV感染和移植后淋巴細胞增殖疾病

　　既然90%以上的人都曾感染過EB病毒，也都有病毒抗體保護機體免受病毒的侵襲，那么什么情況下，EBV病毒會大量復制，感染機體，從而發展成為機體無法抗衡的疾病呢?

　　答案是機體的免疫功能受到嚴重破壞的時候。機體的免疫功能極度低下的情況下，針對各類病毒的特異性的細胞免疫也降低，從而使機體無法清除感染或體內激活的病毒，導致病毒活動性感染和相關疾病的發生。

　　骨髓和異基因造血干細胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT)后常見的EBV感染就是這種情況。對異基因造血干細胞移植(Allo-HSCT)患者而言，由于預處理中的大劑量放/化療使用，以及防止移植后移植物抗宿主病(GvHD)的發生使用的免疫抑制劑的應用，使機體的免疫功能受到嚴重破壞，EBV感染可發展為PTLD。

　　3、EBV感染導致的PTLD的治療

　　PTLD(Post Transplantation Lymphoproliferative Disorder, PTLD)是異基因造血干細胞移植后的一種嚴重并發癥，其患者死亡率高達84.6%。

　　雖然臨床上使用一些抗病毒性藥物、免疫蛋白等藥物，如利妥昔單克隆抗體、更昔洛韋、磷甲酸鈉等抗病毒藥物，可以有效抑制病毒的復制，但這些藥物存在明顯的骨髓抑制、腎臟損傷等毒副作用;減停免疫抑制劑的方法無法在短期內修復機體的免疫功能，且移植早期減少免疫抑制劑的使用會增加GVHD發生的風險。

　　對于這些患者，細胞免疫在預防和控制病毒感染的過程中起著非常重要的作用，因此，恢復細胞免疫是預防病毒再激活所必需的。

　　4、EBV特異性的CTL細胞治療EBV感染導致的PTLD

　　EBV-CTL細胞特性

　　EBV-CTL細胞是可以特異性識別和殺傷EBV感染細胞的細胞毒T淋巴細胞系，是生理條件下機體免疫系統抗病毒感染主要成份。通常條件下，EBV的感染可以誘導機體產生細胞毒T淋巴細胞(CTL)和輔助性CD4細胞，以便及時清除EBV轉化的宿主細胞。CTL通過細胞表面的T細胞受體，識別那些被EBV感染或轉化的異常細胞，通過釋放顆粒酶和穿孔素殺傷靶細胞，從而達到清除感染和殺傷轉化細胞的作用。

　　穿孔素/顆粒酶途徑

　　CTL可釋放溶解顆粒，內含兩種細胞毒性蛋白質，即穿孔素和顆粒酶。穿孔素儲存于靜止CTL細胞內，激活后形成膜攻擊復合物(MAC)可插入細胞膜，令細胞外的水分及電解質迅速進入細胞內，導致細胞崩解。顆粒酶是存在于NK細胞和CTL細胞內的一類重要的絲氨酸蛋白酶，可通過穿孔素在靶細胞膜上形成的通道進入靶細胞，也可借助顆粒酶受體內吞進入胞內，通過激活凋亡相關的酶系統而介導靶細胞凋亡。

　　Fas/FasL途徑

　　激活的CTL表達膜型FasL和產生可溶型FasL與靶細胞表面的受體Fas結合，通過一系列的信號轉導過程，最終活化內源性核酸內切酶CAD，進入細胞核，降解DNA，導致靶細胞凋亡。

　　細胞因子途徑

　　CTL分泌腫瘤壞死因子(TNF)，如TNF-α、TNF-β。這些效應分子可分別與靶細胞表面的Fas和TNF受體結合，通過激活胞內半胱氨酸蛋白酶系統，介導靶細胞凋亡。

　　EBV-CTL細胞治療EBV感染導致的PTLD的治療效果

　　CTL細胞可以通過TCR受體識別由感染細胞HLA-I類分子呈遞的EBV病毒抗原肽，特異性的殺傷高表達抗原的感染細胞，消滅病毒，而對其他細胞無殺生作用，在移植后，免疫系統受到抑制的情況下，可以有效的識別EBV病毒感染細胞，并不增加GVHD發生的風險。由于人體所有的有核細胞都表達I類HLA分子，因此，CTL細胞原則上可以識別和清除幾乎所有感染自身細胞，到達控制EBV病毒的作用。

　　國外研究報道，對114例移植后的患者進行了EBV-CTL的輸注，其中101例預防性輸注的患者均沒有發生PTLD，13例治療性輸注，11例達到持續緩解，主要的副反應為病變部位的局限性腫脹。Gerdemann等人制備的抗CMV、EBV、AdV三種病毒能力的CTL，其臨床有效率高達80%。這些數據都表明了特異性CTL治療移植后CMV、EBV再復發的有效性和安全性，為患者提供了更多的治療選擇。

　　Doubrovina等人做過EBV特異性CTL治療PTLD患者有效率達到了68%，國內也有文獻報道過CMV特異性CTL治療造血干細胞移植后CMV病毒感染有效率達66%，且副作用只出現了發熱。

　　細胞免疫治療作為一種新型治療方式，能夠幫助機體建立抗病毒免疫，有效率高且副作用少，是治療移植后EBV感染的新途徑。

　　5、齊魯細胞EBV-CTL項目的研發

　　本公司看好EBV-CTL這種新型的細胞免疫治療方式，積極進行該領域的布局，開發針對EBV、CMV等病毒抗原的CTL細胞。

　　公司利用特殊培養體系使EBV-CTL細胞在21天的培養周期內，可以增值200倍以上，EBV-CTL細胞對特異性靶細胞的殺傷效率在效靶比為1:1的情況下達到80%以上，另外，公司開發了針對T細胞的凍存制劑，能夠保證凍存的EBV-CTL細胞能夠發揮和新鮮EBV-CTL細胞同等的殺傷效果，為異基因造血干細胞移植后EBV感染的患者提供了更好的治療選擇。

　　免疫療法采用體外擴增病毒特異性的細胞毒性T細胞(CTL)，已被探索和證實為有效的治療或預防EBV感染的方案。輸注體外擴增、EBV特異性的CTL被證明是安全和有效的治療和預防方式，這些發現對同種異體干細胞移植受體的EBV免疫治療具有潛在的意義。

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